包蟲IgG抗體檢測試劑盒（酶聯(lián)免疫法）說明書
【產(chǎn)品名稱】
通用名稱：包蟲IgG抗體檢測試劑盒（酶聯(lián)免疫法）
【包裝規(guī)格】 
48人份／盒，96人份／盒
【預(yù)期用途】
本試劑盒用于體外定性檢測人血清樣品中的包蟲IgG抗體。
本品系用包蟲抗原包被的微孔板和酶標(biāo)記抗人IgG單克隆抗體及其他試劑制成，用于包蟲病的臨床輔助診斷。
包蟲病是棘球蚴?。‥chinococosis）的俗稱，是由棘球絳蟲的幼蟲寄生于人體引起的一種人獸共患寄生蟲病。引起包蟲病的病原主要有：細(xì)粒棘球絳蟲的幼蟲引起囊型包蟲?。欢喾考蚪{蟲的幼蟲引起泡型包蟲病。家犬和狼、豺、狐等食肉動物是棘球蚴絳蟲的傳染源，但家犬是主要傳染源。作為終宿主的家犬排出成熟節(jié)片及大量蟲卵時，污染草地、水源、家居環(huán)境，食草動物和人均因食入蟲卵而被感染。包蟲病患者早期可無任何臨床癥狀，多在體檢中被發(fā)現(xiàn)。主要的臨床表現(xiàn)為棘球蚴囊占位所致壓迫、刺激、或破裂引起的一系列癥狀。包蟲病可發(fā)生在全身多個臟器，以肝、肺多見，泡型包蟲病對臟器的危害大于囊型包蟲病，因其可通過外生性增殖向周圍組織浸潤、擴散，也可通過淋巴或血液擴散到其它臟器，猶如惡性腫瘤，就診病人多屬晚期。
包蟲病患者的血清中含有特異性包蟲IgG抗體或循環(huán)抗原或免疫復(fù)合物，檢測人血清樣品中的包蟲IgG抗體，可用于包蟲病的輔助診斷。
【檢驗原理】
酶聯(lián)免疫間接法原理：用包蟲抗原包被微孔板，加待檢者血清到板孔中，包蟲IgG抗體特異性地與微孔板表面的包蟲抗原結(jié)合，形成抗原抗體免疫復(fù)合物。洗板，除去多余物質(zhì)后，加入抗人IgG抗體酶標(biāo)記物，形成（抗原－抗體－二抗酶標(biāo)記物）免疫復(fù)合物。洗板，除去多余的結(jié)合物，加入顯色液，在酶作用下產(chǎn)生顏色反應(yīng)，通過酶標(biāo)儀測定顯色反應(yīng)的強弱即可定性檢測待檢樣品中的包蟲IgG抗體。
【主要組成成分】
1. 本試劑盒包含的組份
序號 組份名稱 主要成分 使用方法 裝量
    96人份／盒 48人份／盒
1 預(yù)包被包蟲抗原的微孔板 微孔板中預(yù)包被包蟲天然抗原。 可拆成單孔，直接使用 96孔 48孔
2 抗人IgG抗體酶標(biāo)記物 辣根過氧化物酶（HRP）標(biāo)記的抗人IgG單克隆抗體（來源于小鼠）；硼酸鹽緩沖液，含防腐劑、穩(wěn)定劑。 直接使用 6.5mL×1瓶 3.5mL×1瓶
3 包蟲IgG抗體陽性對照 包蟲IgG陽性人血清；硼酸緩沖液，含0.02%硫柳汞、穩(wěn)定劑。 直接使用 1.0mL×1支 1.0mL×1支
4 包蟲IgG抗體陰性對照 包蟲IgG陰性人血清；硼酸緩沖液，含0.02%硫柳汞、穩(wěn)定劑。 直接使用 1.0mL×1支 1.0mL×1支
5 包蟲IgG抗體臨界對照 包蟲IgG陽性人血清；硼酸緩沖液，含0.02%硫柳汞、穩(wěn)定劑。 直接使用 1.8mL×1支 1.8mL×1支
6 顯色液A 檸檬酸、過氧化氫。 直接使用 6.5mL×1瓶 3.5mL×1瓶
7 顯色液B 檸檬酸、四甲基聯(lián)苯胺（TMB）。 直接使用 6.5mL×1瓶 3.5mL×1瓶
8 濃縮洗滌液 磷酸鹽緩沖液，含0.5%Tween-20，10倍濃縮。 用蒸餾水或去離子水10倍稀釋后使用 50mL×1瓶 50mL×1瓶
9 樣品稀釋液（IgG） 硼酸鹽緩沖液，甘油。 直接使用 50mL×2瓶 50mL×1瓶
10 終止液 0.5 mol/L H2SO4溶液。 直接使用 6.5mL×1瓶 3.5mL×1瓶
11 密封袋   1個 1個
12 封板膜   4片 4片
13 記錄紙   1份 1份
注：酶標(biāo)記物、陽性對照、陰性對照、臨界對照，必須使用試劑盒配備的，不能使用其它批號產(chǎn)品。顯色液A、顯色液B、終止液、濃縮洗滌液為通用試劑，可用于本公司所有ELISA試劑盒。
2. 需要但未提供的材料：
微孔板清洗器
(5～40)μL、(40～200)μL、200μL～1mL移液器
37℃恒溫設(shè)備
微孔振蕩器
【儲存條件及有效期】
于2℃～8℃避光保存，有效期為12個月。生產(chǎn)日期及失效日期見標(biāo)簽。
拆封后未用完的微孔板應(yīng)放入密封袋內(nèi)2℃～8℃保存。各組份拆封后應(yīng)在一個月內(nèi)用完。
【適用儀器】
具有450nm、630nm波長的酶標(biāo)儀
【樣品要求】
應(yīng)按照臨床采血技術(shù)規(guī)范操作采集血清。室溫保存樣品不要超過8小時；若實驗在8小時以后進行，需將樣品保存在2℃～8℃；如保存超過1周則保存在-20℃以下，并盡量避免反復(fù)凍融，凍融次數(shù)不宜超過5次。盡管膽紅素、血紅蛋白、甘油三酯對本試劑盒檢測結(jié)果無顯著干擾，仍應(yīng)避免使用黃疸、溶血或高血脂樣品。明顯被污染的樣品不能用于檢測。
【檢驗方法】
1.  試驗過程注意事項
1.1  試劑盒各組份從冷藏環(huán)境中取出時，應(yīng)在室溫（20℃～25℃）平衡至無潮氣方可使用。拆封后未用完的包被板應(yīng)放入密封袋內(nèi)保存。
1.2  在儲存及溫育過程中，應(yīng)避免強光直接照射。所有試劑瓶蓋須蓋緊以防止蒸發(fā)和污染。
1.3  為避免試劑或樣品的微生物污染及交叉污染，應(yīng)使用一次性吸嘴，不要重復(fù)使用。
1.4  在取用對照品和酶標(biāo)記物之前應(yīng)輕輕搖動使其充分混勻，加樣前，使用微孔振蕩器充分混勻稀釋過的樣品。
1.5  嚴(yán)格遵守規(guī)定的溫育時間和溫度。如果第一個孔與最后一個孔加樣之間的時間間隔太長，將會導(dǎo)致不同的“預(yù)溫育”時間，從而明顯地影響到測量值的準(zhǔn)確性及重復(fù)性。
1.6  洗滌結(jié)束時，應(yīng)將微孔板倒扣于紙巾上并輕輕敲打，以確保所有孔內(nèi)均無洗滌緩沖液，避免產(chǎn)生泡沫。如果使用自動洗板機，應(yīng)注意正確操作。
2.  試驗準(zhǔn)備
2.1  試劑盒反應(yīng)試劑準(zhǔn)備
2.1.1  微孔條
將檢測所需數(shù)量的微孔條固定于板架上，剩余的微孔條放入密封袋中保存。
2.1.2  洗滌液
在干凈的量筒內(nèi)稀釋濃縮洗滌液。50mL濃縮洗滌液加入蒸餾水或去離子水至500mL，混勻。
2.1.3  其它液體組份
直接使用，使用前應(yīng)輕輕搖動使其充分混勻。
2.2  樣品準(zhǔn)備
樣品1:100稀釋：取10L待檢樣品，加入至含有1mL樣品稀釋液（IgG）的小試管內(nèi)，充分混勻。
3．  檢測過程
3.1  每次實驗每板須設(shè)空白孔（若以雙波長檢測不設(shè)空白孔）、陽性對照、陰性對照各1孔，臨界對照3孔?？瞻卓撞患訕悠泛兔笜?biāo)記物，只加洗液、顯色液A、顯色液B和終止液；陽性對照、陰性對照、臨界對照直接使用，100L/孔。其余每孔加入稀釋后樣品100L。置37℃±1℃溫育30分鐘。
3.2  甩凈孔中液體，將洗液注滿每孔（約300μL/孔）后，甩凈拍干，反復(fù)3次。除空白孔外每孔加酶標(biāo)記物50μL，置37℃±1℃溫育30分鐘。
3.3  甩凈孔中液體，同上洗板3次，拍干后各孔加顯色液A、顯色液B各50μL，置37℃±1℃避光15分鐘，每孔加入終止液50μL，輕微震蕩微孔板以混合均勻。
3.4  單波長檢測：以空白孔調(diào)零，用酶標(biāo)儀讀取450nm處的A值；
雙波長檢測：用酶標(biāo)儀讀取450nm和630nm處的A值，以A450nm－A630nm計算A值。
4.  參考范圍
陰性對照A值≤0.15，0.20≤臨界對照A值平均值≤0.80，臨界對照A值平均值／陰性對照A值平均值≥2.0，陽性對照A值＞臨界對照A值平均值，證明實驗成立，否則試驗結(jié)果無效，需重新試驗。
5.  結(jié)果判定
計算S/CO值，S/CO=樣品A值／臨界對照A值平均值。
反應(yīng)性（R）：S/CO≥1.1
可疑（S）：0.9＜S/CO＜1.1
陰性（N）：S/CO≤0.9
【檢驗結(jié)果的解釋】
1.  結(jié)果為反應(yīng)性提示包蟲感染，對反應(yīng)性或可疑結(jié)果建議進行影像學(xué)檢查。 
2.  檢測結(jié)果僅供臨床參考，臨床醫(yī)生應(yīng)結(jié)合病史、癥狀及影像學(xué)檢測結(jié)果做出診斷。
【檢驗方法的局限性】
1.  樣品或試劑被微生物污染以及試劑的交叉污染可能導(dǎo)致錯誤結(jié)果。
2.  研究顯示本品與弓形蟲、肺吸蟲、旋毛蟲、血吸蟲IgG抗體陽性血清無交叉反應(yīng)；與部分囊蟲IgG抗體陽性血清有交叉反應(yīng)，應(yīng)結(jié)合病史、癥狀、影像學(xué)檢測結(jié)果及流行病學(xué)調(diào)查加以甄別；與其它病原體的交叉反應(yīng)尚無實驗數(shù)據(jù)。
【產(chǎn)品性能指標(biāo)】
1.  靈敏度、特異性
本品檢測1080例包蟲病流行區(qū)和非流行區(qū)人群樣本，與影像學(xué)檢測比較，其靈敏度為91.0%，特異度為94.7%。
2.  精密性
批內(nèi)變異系數(shù)CV（%）不高于15%（n＝10）。
3.  交叉反應(yīng)
與弓形蟲、肺吸蟲、旋毛蟲、血吸蟲等病原體的IgG抗體陽性血清未發(fā)現(xiàn)交叉反應(yīng)；與部分囊蟲IgG抗體陽性血清有交叉反應(yīng)。
與甲型肝炎病毒、乙型肝炎病毒、丙型肝炎病毒、人類免疫缺陷病毒HIV（1/2型）陽性血清、肝癌患者、肝囊腫患者、細(xì)菌性肝膿腫患者、膽囊積液患者、肺結(jié)核患者血清無交叉反應(yīng)。
4.  內(nèi)源性物質(zhì)干擾試驗
樣品中膽紅素0.1~0.4 mg/mL、血紅蛋白5~50 mg/mL、甘油三酯2~8 mg/mL濃度范圍內(nèi)對本品檢測結(jié)果無顯著干擾。
5.  對國家參考品檢測能力
本品檢測國家參考品（230029-201001），8份陰性參考品檢測結(jié)果全部為陰性；8份陽性參考品檢測結(jié)果全部為陽性；精密性≤15％（n=10）；最低檢出量不高于1：16，均符合國家參考品標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定。
【注意事項】
1.  本品僅用于體外診斷，一次性使用。
2.  用于制備本品陰性對照、陽性對照、臨界對照的血清已經(jīng)HBsAg、HCV抗體、梅毒螺旋體抗體和HIV抗體檢測為陰性，試劑盒內(nèi)其它各種組份均無生物傳染性。由于不能保證檢測各組份所有的傳染性因素，因此本品應(yīng)作為具有潛在的傳染性材料對待，所有接觸試劑盒的人員應(yīng)按實驗室規(guī)范要求進行操作。
3.  任何臨床樣品都應(yīng)作為具有傳染性樣品對待。
4.  待檢樣品及其他潛在感染材料試驗后應(yīng)予以消毒。
5.  注意避免皮膚或黏膜直接接觸試劑或樣品。顯色液中含TMB，終止液含硫酸。含TMB的試劑在試驗中會誘發(fā)其它反應(yīng)；含硫酸的試劑有腐蝕性。一旦接觸到這些液體，應(yīng)立即用水徹底清洗。
【標(biāo)識的解釋】
包裝標(biāo)簽
的標(biāo)識    
標(biāo)識的含義 溫度限制 體外診斷醫(yī)療器械 參考使用說明 不得二次使用
【參考文獻(xiàn)】
 [1] 中華人民共和國衛(wèi)生行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)（WS257-2006）“包蟲病診斷標(biāo)準(zhǔn)”。
【基本信息】
注冊人/生產(chǎn)企業(yè)名稱：珠海經(jīng)濟特區(qū)海泰生物制藥有限公司
住所：珠海市唐家灣鎮(zhèn)港灣大道創(chuàng)新四路18號     
聯(lián)系方式：
售后服務(wù)單位名稱：
聯(lián)系方式：
生產(chǎn)地址：珠海市唐家灣鎮(zhèn)港灣大道創(chuàng)新四路18號     
生產(chǎn)許可證編號： 
【醫(yī)療器械注冊證編號/產(chǎn)品技術(shù)要求編號】
【說明書核準(zhǔn)及修改日期】